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慢病毒包装技术服务

格: ¥5,000.00
牌:仁源生物
标签:慢病毒???293T???
销售情况:售出 0 件(0 条评论)
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当代基因治疗研究的热门方法是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织,研究靶基因的上调或抑制情况。例如,有些异常基因(癌基因、病毒基因),可通过反义核酸技术引入外源片段将其抑制;有些基因本身有治疗作用,体外合成该基因导入体内使其表达丰度提高。

常用的几种病毒载体的区别


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病毒载体已成为当前基因治疗载体研究的热点,其优势在于:

1、 病毒包装技术经历了多年的研究,已趋于成熟,可用于产业化大量生产

2、 病毒基因组的结构简单、分子背景比较清楚,稳定易于改造、易于制备

3、 病毒的宿主范围广,且具有高效的靶向特异性

4、 在目的基因表达方面相对于脂质体介导的效果更明显、长时、稳定

5、 通过载体改造的方式形成了复制缺陷型结构,安全性高

慢病毒(Lentivirus) 载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。作为快速有效的遗传物质投递工具,慢病毒的应用在生物医疗研究领域已广泛流行。

特点

1、 区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,常用于感染难转染的细胞,如原代细胞、神经元细胞、bet356手机体育在线_博彩bet356中途_Bet356 奖金不能用于投注、不分化细胞、心肌细胞、肝细胞、内皮细胞、肿瘤细胞,且效率近100%

2、 可装载DNA片段容量高达6kb

3、 目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,形成稳定遗传物质,使得目的基因在细胞中可稳定长期表达。

4、 病毒载体颗粒通过包装元件和含病毒基因组质粒共转染包装细胞系。利用逆转录机制构建自我失活(SIV)的HIV-1来源的载体,一旦转移到靶细胞后,它就丧失了病毒长末端重复的转录能力,减少了产生重组病毒的机会,并避免了与启动子干扰的问题。

综上特点决定了其应用

1、 用慢病毒载体携带目的基因比用质粒瞬时转染更适于稳转株构建

2、 载体带有可进行高效率的包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组中的序列元件,其产生滴度更高,为活体动物模型实验提供高性价比的包含目的基因的病毒液

3、 其高转导效率及整合到基因组的特点为RNAi和cDNA 克隆以及报告基因的研究提供了一个有利的途径

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慢病毒包装服务流程

1、 制备DNA/转染试剂复合物

2、 转染工具细胞:通常使用293T细胞

3、 收获病毒

4、 去除蛋白等杂质

5、 检测滴度?

服务提供

1、 不少于1ml慢病毒包装产物

2、 滴度不低于108

3、 提供对照载体

4、 提供包含实验过程和中间结果的详细技术报告

注意要点

1、 包装好的病毒可以根据用户要求感染目的细胞

2、 RNA干扰慢病毒提供三条不同的shRNA序列

服务周期

3-6周

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